1、開機

(1)打開房間總電源開關;

(2)望遠鏡打開電腦電源開關;

(3)打開數碼相機電源開關;

(4)打開顯微鏡電源開關(打開汞燈電源開關)。

2、調試顯微鏡光路

(1)把載玻片放到載物台上,調節聚焦;

(2)根據物鏡指數乘0。8確定聚光鏡光圈值,調整到位;

(3)將視場光闌縮小,然後調節聚光鏡高度,直到從目鏡中觀察到視場光闌的清晰成像;

(4)放大視場光闌顯微鏡,使其在目鏡中的黑框擴展到視野以外。

3、調試數碼相機拍攝照片

(1)在顯微放大鏡鏡取景器中對好視野及焦距;

(2)打開photoshop程序;

(3)點擊 “文件 -- 自動…。”調出相機控制窗口;

(4)ZOOM定為77,拍攝圖片格式為640*480;

(5)在相機控制窗口上點preview,觀察預覽圖像的亮度,選擇適當的曝光時間使預覽圖片的亮度合適;

(6)點拍攝按紐拍攝,等待幾秒鐘後圖片傳回電腦並在photoshop窗口裡顯示;

(7)繼續拍攝下一張照片;

(8)拍攝十來張照片後要及時保存照片;

(9)先關閉相機控制按紐,並保存拍攝條件到默認值;

(10)在photoshop中保存剛拍攝的照片到指定文天文望遠鏡件夾中,保存後要關閉照片;

(11)保存並關閉全部照片金相顯微鏡後重新打開相機控制窗口繼續拍攝;

(12)拍攝全部完成後保存所拍攝的照片,需要時將照片通過網絡上傳到校園網服務器上,不能使用U盤或軟盤轉移文件,或者將照片文件刻錄到光盤上。


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相差物鏡的後焦面裝有相板。按物鏡放大率與反差效果的不同,相板放大鏡圓環(共軛面)的大小與結構亦不同。轉盤聚光器的環狀光闌為一系列的透光的,不同大小的明亮環孔,與不同放大率的物鏡相應。使用時嚴格匹配,當物鏡更換時,環狀光闌亦作相應的更換或調整。

在視場中觀察所見,環狀光闌為一明亮的圓環,而相板的圓環為一暗環。互相匹配的明環與暗環大小一致。在使用時兩者要合軸,互相重疊。兩環的重疊,須通過合軸調節方能取得。其方法如下:



(1)相差物鏡與環狀光闌的匹配:正確地匹配取決於所用物鏡放大率。例如,當顯微鏡使用40×相差物鏡時,環狀光闌轉向ph3或40位,使相應地環狀光闌進入光路。



(2)把CT放入目鏡筒:從目鏡筒取出一個目鏡,換入調中合軸望遠鏡(CT)。CT為一眼透鏡,也是可行升降調節的望遠目鏡,專為觀察視場中明環與暗環圖像之用。因為用一般目鏡看不見兩環的清晰圖像。CT在使用前眼透鏡應處於最低位,即CT為最短小的狀態。



(3)明環與暗環的聚焦:一手固定位於目鏡筒中的CT鏡筒,使其透鏡位置不能上移,另一手逆時針轉到CT上部可調的眼透鏡部分。轉動的同時,通過CT向現場中觀察,即國旋轉邊觀察初始,兩環可能為模糊的圖像,繼續轉動CT目鏡可調部分至清晰地窺見明環與暗環止。



(4望遠鏡)明環與暗環的調中重疊:相板的暗環是固定不動的,處於光路之中,暗環的中心,即顯微鏡光軸天文望遠鏡的中心。環狀光闌的亮環可調節移動。轉盤聚光器環狀光闌的位置,因聚光器的可調其中心位置,往往偏離光軸軸心,需調整,使其歸中。環狀光闌的調中裝置或部件,因廠家或型號的不同而有別。如OLYMPUS BH2-PC型相差顯微鏡,環狀光闌調中裝置為位於轉盤聚光器兩側的兩個伸絲自如的調中螺杆,用以操縱改換環狀光闌的方位,達到調中;而Nikon FIVORPHOT型顯微鏡的相差裝置,其環狀光闌的調中部件為位於轉盤聚光器表面,可向任一方向滑動的環狀鈕。調中時,手指調中裝置,移動明環,使之與暗環合一。在兩環調中過程,始終在通過CT的觀察下進行。

在調節過程中,如亮環比暗環小,並位於暗環內側時,應降低聚光器位置,使亮環放大。若亮環大於暗環時,應提升聚光器,使亮環縮小。如聚光器已升至最頂點還不能完全重合,可能是載玻片過厚之故。



(5)回裝觀察目鏡:待相差物鏡的暗環與環狀光闌的亮環調中、重疊後,從目鏡筒中取出CT,放回觀察用金相顯微鏡的接目鏡,以便鏡檢觀察。


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1、相差物鏡的調換安裝

從物鏡轉換器上拆下普通物鏡,旋顯微鏡入相差物鏡,與普通目鏡配套使用。



2、轉盤聚光器的調換安裝

旋轉聚光器升降螺旋,把普通明視場聚光器至最低位,旋松固緊螺絲,卸下聚光器。把轉盤聚光器安放到相應位置上,旋緊固緊螺絲,轉動聚光器升降放大鏡螺旋,使聚光器升至最高位置。轉盤聚光器的標示孔,朝向操作者。此時,轉盤聚光器上面的聚光鏡部分,進入光路;下面的環狀光闌轉盤,可視需要轉動使用,把與物鏡匹配的環孔旋入光路,使之處於轉盤聚光鏡下。



3、把綠色濾色鏡放入鏡座的濾色鏡架上

轉盤聚光器調換安裝後,要望遠鏡進行合軸調中,使聚光器的光軸與顯微鏡的主光天文望遠鏡軸合一。其步聚如下:



(1)把轉盤聚光器的環狀光闌金相顯微鏡調至“0”位,明視場照明的普通可變光闌進入光路。



(2)旋轉聚光器升降螺旋,聚光器升至最高位。



(3)接通照明光源,使視場明亮。



(4)把被檢樣品放到載物台上,用低倍(4×)物鏡聚焦。



(5)縮小鏡座上的視場光闌開孔,至最小。



(6)從目鏡觀察,在暗視場中可見一縮小的、明亮的、多角形的視場光闌圖像。



(7)轉動轉盤聚光器的兩個調中杆,推動聚光器,把視場中的明亮的多角形的視場光闌圖像,調至視場中央。



(8)開放視場光闌至視場同大,視兩者周邊是否完全重合;否則,復用調中螺杆,使聚光器精神調中。


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Q:為什麼有些物鏡是油鏡和水鏡? 
A:物鏡的分辨率很大程度上取決於物鏡的NA值,NA值又受金相顯微鏡透鏡與標本之間介質的折射率的影響。高折射率的介質可以聚集更多的光使圖顯微鏡像更亮、更清晰。當使用空氣作為透鏡和標本之間的介質時,一般低NA值的物鏡就可滿足要求。但是,高NA值的物鏡需要高折射率的介質,那麼油可以達到高折射率。當放大鏡NA 值超過1。0時,在聚光鏡的頂部透鏡望遠鏡載玻片的底部點油可以達到更好的效果。浸油物鏡通常會標記“o天文望遠鏡il”或“oel”。一些物鏡會應用於活體標本的觀察,就需要水作為介質。這些物鏡通常會標記“WI”。


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A:在使用暗場顯微鏡時為了保持背景足夠黑暗,物鏡的天文望遠鏡數值孔徑不應比暗場聚顯微鏡光鏡高。虹彩光闌可以降低物鏡的數值孔徑,允許高數值孔徑的物鏡應用於暗場顯微鏡。虹彩光闌可以使高於數值孔徑 1。2的物鏡應用於暗場顯微鏡。對於普通明場觀放大鏡察,虹彩光闌可以處於打開望遠鏡狀態。金相顯微鏡


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A:事實表明,在用入射光進行觀察時,暗場聚光鏡不讓光束望遠鏡從上到下的通過被顯微鏡放大鏡物體。然而,為了獲得很高的放大倍率,就需要帶虹彩光闌的物鏡來配合暗場聚光鏡使用。利用反射光進行暗場觀察時,需要明場/暗場物鏡進行在暗場下工作。這些物鏡(天文望遠鏡標記BD/BF/DF)的功能是利用被檢物體表面反射或衍射光而形成的明亮圖像金相顯微鏡


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A:齊焦距離指的是選擇距離從物鏡轉盤開口到標本的定焦點的距離放大鏡(現代顯微鏡顯微鏡這個距離通常是45mm)。使所有不同倍率望遠鏡的物天文望遠鏡鏡在轉入光路後只需輕微調焦的一個標准距離,這就被叫做同焦距。如果在轉換不同倍率的物鏡時,已聚焦好的標本始終在視野的中心,那我們稱為在軸。金相顯微鏡


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A:計算視場直徑(單位mm),是用目鏡的視場數除以顯微鏡物鏡的放大倍率。例如,10倍的物鏡同時使用視場數為2放大鏡2的目鏡,那麼視場直徑是2。2mm。當使用變倍拉杆時,物鏡望遠鏡的放大倍天文望遠鏡率要乘以變倍數,再被目鏡的視場數相除,才能得到金相顯微鏡准確的視場直徑。


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一、明視野觀察(Bright field\BF)
金相顯微鏡
明視野鏡檢是大家比較熟悉的一種鏡檢方式,廣泛應用於病理、檢驗,用於觀察被染色的切片,所有顯微鏡顯微鏡均能完成此功能。



二、暗視野觀察(Dark field\DF)

暗視野實際是暗場照放大鏡明發。它的特點和明視野不同,不直接觀察到照明的光線,而觀察到的是被檢物體反射或衍射的光線。因此,視場成為黑暗的背景,而被檢物體則呈現明亮的像。

暗視野的原理是根據光學上的丁道爾現像,微塵在強光直射通過的情況下,人眼不能觀察,這是因為強光繞射造成的。若把光線斜射它,由於光的反射,微粒似乎增大了體積,為人眼可見。

暗視野觀察所需要的特殊附件是暗視野聚光鏡。它的特點是不讓光束由下至上的通過被檢物體,而是將光線改變途徑,使其斜射向被檢物體,使照明光線不直接進入物鏡,利用被檢物體表面反射或衍射光形成的明亮圖像。暗視野觀察的分辨率遠高於明視野觀察,最高達0。02—0。004。



三、相差鏡檢法(Phase contrast\PH)

在光學顯微鏡的發展過程中,相差鏡檢術的發明成功,是近代顯微鏡技術中的重要成就。我們知望遠鏡道,人眼只能區分光波的波長(顏色)和振幅(亮度),對於無色通明的生物標本,當光線通過時,波長和振幅變化不大,在明場觀察時很難觀察到標本。

相差顯微鏡利用被檢物天文望遠鏡體的光程之差進行鏡檢,也就是有效地利用光的干涉現像,將人眼不可分辨的相位差變為可分辨的振幅差,即使是無色透明的物質也可成為清晰可見。這大大便利了活體細胞的觀察,因此相差鏡檢法廣泛應用於倒置顯微鏡。


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雙目體視顯微鏡又稱“實體顯微鏡”或“解剖鏡”,天文望遠鏡是一種具有正像立體感地目視儀器。在生物、醫學領域廣泛用於切片操作和顯微外科手術;在工業中用於微小零件和集成電路的觀測、裝配、檢查等工作。它具有如下特點:

1。利用雙通道光路,雙目鏡筒中的左右兩光束不是平行,而是具有一定的夾角——體視角(一般為12°-1顯微鏡5°),為左右兩眼提供一個具有立體感的圖像。它實質上是兩個單放大鏡鏡筒顯微鏡並列放置,兩個鏡筒的光軸構成相當於人們用雙目觀察一個物體時所形成的視角,以此形成三維空間的立體視覺圖像。

2。像是直立的,便於操作和解剖,這是由於在目鏡下方的棱鏡把像倒轉過來的緣故。

3。雖然放大率不如常規顯微鏡,但其工作距離很長。

4。焦深大,便於觀察被檢物體的全層。

5。視場直徑大。望遠鏡

目前體視鏡的光學結構是由一個共用的初級物鏡,對物體成像後的兩光束被兩組中間物鏡——變焦鏡分開,並成一體視角再經各自的目鏡成像,它的倍率變化是由改變中間鏡組之間的距離而獲得的,因此又金相顯微鏡稱為“連續變倍體視顯微鏡”(Zoom-stereo microscope)。隨著應用的要求,目前體視鏡可選配豐富的選購附件,如熒光,照相,攝像,冷光源等等。


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